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    LIBS快速元素分析技術在微生物檢測中的應用

    發(fā)布時間: 2020-06-04  點擊次數(shù): 1823次

    LIBS技術,是當前*份能夠測量所有種類的樣品、無須預處理、并且單次測量即可得到全部元素特別包括輕元素在內(nèi)的“指紋”的光譜分析技術(Miziolek and others 2006)。LIBS可以實現(xiàn)微空間分辨率、低元素檢測極限的實時快速測量,因此對于含特定特征元素的、形體非常微小的微生物識別和分類具有獨到的優(yōu)勢。此外,菌落的顏色、質(zhì)地、細胞的成分都會作用于激光脈沖激發(fā)時呈現(xiàn)的等離子體發(fā)射光譜,作為分類鑒定的依據(jù)(Lightigo團隊,2018)。Sivakumar等人曾通過Mg、P、K、Na、Ca等關鍵元素的特征譜線峰值差異,判斷大腸桿菌是否已經(jīng)死亡;Multari等人曾通過LIBS技術在雞肉、牛肉餡、蛋殼、萵苣、臘腸等食物上檢測到致病性大腸桿菌;等等。

     

    LIBS的微生物識別和分類技術,在土壤理化性質(zhì)、土壤營養(yǎng)、植物表型、作物營養(yǎng)、食品質(zhì)量檢測、毒理學的實驗研究中的應用迅速發(fā)展。

     

    本研究中,Lightigo團隊應用LIBS技術,通過樣品的原子發(fā)射譜線分析,對大腸桿菌、CCM4223金黃色葡萄球菌、CCM 4750金黃色葡萄球菌(MRSA -甲氧西林耐藥)、CCM3953金黃色葡萄球菌- (MSSA-甲氧西林敏感)、葡萄球菌、假中間葡萄球菌,共6種細菌實現(xiàn)了快速自動檢測和分類。

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    全部細菌樣本的LIBS譜線數(shù)據(jù)中,Mg、Na、Ca都為其主元素譜線,呈現(xiàn)相近的譜線特征;其原因在于細菌細胞外膜中都含有Mg2+和Ca2+離子,從而具有相近的元素構成,例如下圖的“CCM 4750金黃色葡萄球菌(MRSA -甲氧西林耐藥)”樣品的LIBS譜線:

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    但是,各個樣本的完整譜線“指紋”仍可以作為細菌樣品的分類依據(jù)。儀器軟件內(nèi)置的PCA算法是實現(xiàn)樣品分類可視化的常用的分析工具,下圖為LIBS譜線PC1 vs. PC2處理結果:

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    可見,LIBS能夠?qū)毦鷺悠纷龀霰容^成功的分類。在此基礎上,Lightigo團隊結合Raman光譜數(shù)據(jù),進一步提升了6類細菌樣品分類的精確度(100%):

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    Lightigo的LIBS元素分析技術在細菌鑒定、檢測和分類的應用中,是一種快速、便捷并且具有前景的分析方法。

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